Свиноматки, оплодотворенные искусственно зараженной спермой СЦВ2

I.Результаты в организме

G. Sarli1, F. Morandi1, S. Panarese1, B. Bacci1, D. Ferrara1, L. Fusaro1, M.L. Bacci1, G. Galeati1, M. Dottori2, P. Bonilauri2, D. Lelli3, G. Leotti4, T. Vila5, F. Joisel5, F. Ostanello1

School of Veterinary Medicine, University of Bologna, Italy,2IZSLER, Reggio Emilia, Italy

3IZSLER, Brescia, Italy, 4Merial, Milano, Italy, 5Merial S.A.S., Lyon, France

Введение

С 1999 докладывали о данных трансплацентарного заражения СЦВ2 и репродуктивных нарушениях (1). Было проведено несколько экспериментальных исследований: внематочное заражение плода (2), орально-назальное заражение беременной беспатогенной (3) или обыкновенной (4) свиноматки, внутриутробное заражение беспатогенной свиноматки (5). Целью данного исследования была оценка клинических и патологических последствий заражения СЦВ2 искусственно зараженной спермой.

Материалы и методы

Девять препубертатных свиней выборочно поделили на: 3 контрольных и 6 зараженных. После синхронизации гормональной течки следовала искусственное оплодотворение (ИО) одной дозой спермы плюс 10 мл суспензии СЦВ2. После ультразвуковой диагностики на 29 день после оплодотворения (ДПО), пустых свиноматок умертвляли на 30 ДПО, а беременных – между 52 и 56 ДПО. Мазки из шейки матки, назальных пазух и ректальные, а также образцы крови собирались еженедельно с 2-х ДПО и до конца экспериментального периода. Образцы сыворотки на прямую и косвенно тестировали на СЦВ2, вирус РРСС, СПВ и адено-вирус. Титры антител в сыворотке определялись путем тестирования последовательного разведения каждой сыворотки, конкурирующими ELISAs (6, 7, 8). Протокол, описанный Olvera et al. (9) использовался для СЦВ2 в реальном времени PCR. Уровни прогестерона в сыворотке измерялись с помощью радиоиммуноанализа (10).

Результаты

На 2-й ДПО ни одна из свиней не показала виремии на все тестированные вирусы. Все животные показали высокие антитела против СЦВ2 во 2-й ДПО (диапазон 1/1000-1/10000), и только одна свиноматка имела низкие титры (1/100). 4 из 6 зараженных свиноматок показали виремию на 7, 21, 28 и 35 ДПО (животное с самым низким уровнем антител против СЦВ2 продолжало показывать положительные результаты на 2 последующие забора образцов в 21 и 35 ДПО). Позже это была единственная свиноматка, давшая положительный результат на мазок (ректальный, 35-й ДПО). Антитела против СЦВ2 снизились после 7 ДПО затем результаты у контрольной группы не менялись, в то время как у инфицированных животных показатели стали выше, чем у контрольных, у которых они упали только после 42 ДПО (Рисунок 1). Ни одна из свиноматок не показали признаки течки после ИО. Беременность была установлена у 3 из 6 зараженных свиноматок и у 3 из 3 контрольных (у одной контрольной свиноматки произошли выкидыши 3 плодов на 21 ДПО). Титры антител в сыворотке против СПВ, вируса РРСС и адено-вируса (общие и anti-gE) снизились на -2 ДПО и в последний ДПО. Прогестерон отсутствовал у всего молодняка при оплодотворении и у всех вырос после течки, но у 3-х не беременных зараженных животных не поднимался до 28 ДПО.

Рисунок 1: Среднее число титров антител СЦВ2 у инфицированной (ИГ) и контрольной группы (КГ)

Обсуждение

В настоящем исследовании проводилась оценка промышленных данных с использованием свиней и внутриматочного заражения СЦВ2. Виремия зафиксирована у 4 из 6 зараженных животных, кроме того, среднее число титров антител было выше только у этих животных. 3 зараженных свиноматки из 6 были не беременны, хотя все контрольные – да. Более того, делаем акцент, что только зараженные свиноматки с низкими титрами антител СЦВ2 на -2 ДПО показали одновременно виремию и распространение вируса из фекалий. Поэтому, 1) заражение СЦВ2 возможно у свиноматок внутриматочно; 2) низкие титры антител увеличивают возможность заражения; 3) инфекция СЦВ2 в период осеменения снижает уровень опоросов.

Ссылки

1. West H, et al., 1999. J Vet Diagn Invest 11:530-32
2. Johnson C, et al., 1999. J Vet Diagn Invest 14:507-12
3. Cariolet R, et al., 2001. Proc ssDNA viruses of plants, birds, pigs and primates, 128
4. Park JS, 2005. J Comp Pathol. 132:139-44
5. Rose N, et al., 2007. J Comp Pathol 136:133-44
6. Sala G, et al., 2000. Proc. V Int. Congress of the ESVV, 253–54
7. Brocchi E, et al., 1990. Atti SISVET 44, 913-17
8. Cordioli P, et al., 1996. Proc XIV IPVS Congress, 86
9. Olvera A, et al., 2004. J Virol Methods. 117:75-80
10. Tamanini C, et al., 1985. Anim Reprod Sci 9:357-64